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分享PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)及建設(shè)基本要求
發(fā)表時(shí)間： 2020-07-10
PCR實(shí)驗(yàn)指的是基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)，其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加，是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)的常規(guī)方法，PCR實(shí)驗(yàn)室廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域，例如：乙型肝炎，禽疫病、艾滋病檢測(cè)，癌基因的檢測(cè)和診斷，個(gè)體識(shí)別，DNA指紋，親子鑒定及法醫(yī)物證等等。湖南實(shí)驗(yàn)室建設(shè)就PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)和建設(shè)要求逐一給大家解釋：
一、PCR實(shí)驗(yàn)室布局
1、PCR實(shí)驗(yàn)室原則上分為：①試劑準(zhǔn)備區(qū)；②樣品制備區(qū)；③擴(kuò)增區(qū)；④擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，共四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域。并設(shè)有專用走廊，各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間，工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。
2、不同功能的工作區(qū)應(yīng)是分隔獨(dú)立的，各工作區(qū)有明顯的標(biāo)志，不能直通，如果緊密連接，需安裝物品傳遞窗。
① 試劑準(zhǔn)備區(qū)和樣品制備區(qū)為擴(kuò)增前區(qū)；
② 擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)為為擴(kuò)增后區(qū)，即從：試劑準(zhǔn)備區(qū)——樣品制備區(qū)——PCR擴(kuò)增室——產(chǎn)物分析室，不得逆向流動(dòng)。
3、實(shí)驗(yàn)室的氣流也應(yīng)從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，不得逆向流動(dòng)。
4、各工作區(qū)的頂部應(yīng)該安裝紫外燈，紫外燈波長(zhǎng)一般為254mm,配置要求為每20㎡一支40W的紫外燈。
二、實(shí)驗(yàn)室各區(qū)功能及主要設(shè)備
1、試劑準(zhǔn)備區(qū)：
① 主要進(jìn)行試劑的制備，分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑盒用于樣品制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)域。
② 試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的試劑。
③ 本區(qū)主要設(shè)備有冰箱，天平，離心機(jī)，加樣器，振蕩器等。
④ 本區(qū)對(duì)氣流壓力的控制，并沒有嚴(yán)格的要求，一般為+10Pa。
2、樣品制備區(qū)：
① 主要進(jìn)行樣品的保存，核酸提取，貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定DNA的合成。
② 本區(qū)主要設(shè)備有冰箱，生物安全柜，離心機(jī)，加樣器，振蕩器等。
③ 本區(qū)的壓力梯度要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎?，以避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染，壓力一般設(shè)計(jì)為+10Pa。
3、擴(kuò)增區(qū)：
① 主要進(jìn)行DNA擴(kuò)增項(xiàng)目。
② 已制備的DNA模板(來自樣品制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑準(zhǔn)備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。
③ 本區(qū)主要設(shè)備有：冰箱，加樣器，離心機(jī)，擴(kuò)增儀等。
④ 本區(qū)的壓力梯度要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免氣溶從本區(qū)漏出，壓力一般設(shè)計(jì)為-25Pa。
4、 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：
① 主要進(jìn)行擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)定。
② 本區(qū)主要設(shè)備有加樣器，洗板機(jī)、酶標(biāo)儀和水浴箱等。
③ 本區(qū)的壓力梯度的要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域，壓力一般設(shè)計(jì)為-25Pa。
三、PCR實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)系統(tǒng)及壓力控制
① 各區(qū)域之間應(yīng)具備單間的實(shí)驗(yàn)工藝流、氣流、物流與人流，形成單向流程的保護(hù)屏障。避免實(shí)驗(yàn)室之間的相互干擾，也防止氣溶膠擴(kuò)散對(duì)實(shí)驗(yàn)過程造成污染。
② PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要求，但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式，嚴(yán)格控制送風(fēng)、排風(fēng)的比例，以保證整個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。
四、PCR實(shí)驗(yàn)室裝飾
① 實(shí)驗(yàn)室圍護(hù)結(jié)構(gòu)應(yīng)牢固，氣密性好;
② 所有陰陽角宜采用圓弧過度;
③ 墻體內(nèi)壁光潔，不積塵、易清洗、易消毒、耐腐蝕;
④ 地面使用環(huán)氧樹脂自流坪或PVC卷材，材料應(yīng)滿足光潔、耐腐蝕、無縫隙、無滲漏的基本要求。
五、PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)
1、區(qū)域大小設(shè)置：樣品制備區(qū)要放置生物安全柜和低溫冰箱，空間應(yīng)大一些。而試劑準(zhǔn)備區(qū)，擴(kuò)增區(qū)，擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，空間可以相對(duì)小一些。
2、應(yīng)急裝置配備：試劑準(zhǔn)備區(qū)，樣品制備區(qū)應(yīng)設(shè)緊急洗眼器，以保證操作人員的安全。
以上內(nèi)容是長(zhǎng)沙實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)給各位分享的PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)及建設(shè)要求的內(nèi)容，想要了解更多實(shí)驗(yàn)室規(guī)劃設(shè)計(jì)、建設(shè)施工、運(yùn)營(yíng)管理、認(rèn)證/認(rèn)可等知識(shí)，請(qǐng)繼續(xù)關(guān)注福臨實(shí)驗(yàn)室官方網(wǎng)站的最新資訊。
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